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层流手术室的空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。不同级别的层流手术室其空气洁净度标准不同，例如美国联邦标准1000级为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤1000颗或每升空气中≤35颗。对房间中间的脏污设备进行清洁和消毒，然后移到干净的周边，直到所有物品都经过处理。10000级层流手术室的标准为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数≤10000颗或每升空气中≤350颗。依次类推。
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层流手术室不仅要求高度洁净的空气（进入手术室的空气首先须经过滤器净化），而且要求能控制气流的流通方向（即采用层流超净装置），使气流从洁净度高的手术区域流向洁净度低的区域，并带走和排出气流中的尘埃颗粒（尘粒）和细菌；层流是一股细小、薄层的气流，以均匀的流速向同一方向输送；净化气流的方向分为垂直层流式和水平层流式两种。垂直层流式（Supply air ceiling for operating theatre）过滤器装在手术病床的正上方，气流垂直吹送，回风口设在墙面的两侧下部（但不宜采用四角或四侧回风），确保手术台洁净度达标，一般多采用垂直层流式效果较好 层流手术室是一个'正压'环境，其空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。要求设计合理，设备齐全，护士工作反应灵敏、快捷，有的工作效率。
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洁净手术室相对于周边区域应维持正压，压力由洁净区到污染区、由高洁净度到低洁净度区域逐级降低，形成有序的压力梯度和定向气流，防止外界污染空气侵入以及低级别环境对高1级别的影响。不同级别的层流系统，其控制空间环境中的空气置换率也不同，洁净度级别越高，置换率越快，反之亦然。只有保证在任何情况下(包括非设计工况或非正常运行工掀都能维持洁净手术部内有序有效的压力梯度，才能真正减少手术部交叉感1染的风险。手术室与非洁净区(含污染走励的压差应大于10 Pa，对室外的压差应大于15 Pa121o
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保证洁净手术室正常工作和非工作期间室内正压所需要的新风量并不相等。严格执行室内卫生清洁处理及隔离、消毒检测制度，落实医疗安全防范措施。本项目独立设置新风系统，有利于室内正压的控制。手术室正常工作时，保证房间正压所需要的新风经循环净化空调机组和回风混合后进入房间;手术室不工作时，保证房间正压所需要的新风由新风系统单独补给。